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(一)适用范围
监测消毒液(含氯消毒液、碘制剂、过氧乙酸、戊二醛等)的有效浓度和染菌量情况。
(二)监测时机
新配制(购进)的消毒液或使用中的消毒液。
(三)基本方法
1、化学指示法:使用试纸测试消毒液的浓度。
2、琼脂倾注法:实验室检测消毒液的染菌量。
(四)基本试剂
1、对于醇类与酚类消毒剂,稀释液用普通营养肉汤即可;
2、对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂,需在肉汤中加入硫代硫酸钠;
3、对于洗必泰、季铵盐类消毒剂,需在肉汤中加入3%(W/V)吐温80和卵磷脂;
4、对于醛类消毒剂,需在肉汤中加入甘氨酸;
5、对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂,需在肉汤中加入3%(W/V)吐温80,以中和被检样液的残效作用。
(五)操作步骤
1、浓度的监测
1)根据消毒剂的种类,选择相应的浓度测试纸条。若检测戊二醛浓度可选择戊二醛测试卡;检测含氯制剂和过氧乙酸采用G-1型消毒液浓度试纸。
2)结果按试纸条说明操作并判断结果。
2、染菌量的监测
1)用无菌移液管吸取使用中消毒液,加入含相应中和剂的缓冲液中,充分混匀,作用约10min.
2)再用无菌吸管分别吸取上述的待检样本,置于2个直径为90mm的灭菌平皿内。
3)加入已熔化的45~48℃的营养琼脂16~18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固。
4)其中一个平板置于(25±1)℃温箱培养7日,观察霉菌生长情况;另一个平板置于(36±1)℃温箱培养72h,记数菌落数,必要时做致病菌(金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等)的检测。
5)计算公式:
消毒液染菌量(cfu/m1)=每个平板上的菌落数×10
3、细菌种类鉴定
1)从营养琼脂中挑取可疑菌落,根据实际情况可选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。
2)接种后将平板置于(36±1)℃温箱培养24~48h,挑取可疑菌落进行微生物学鉴定,必要时做药敏或分子生物学分型。
(六)注意事项
1、正确选择试纸条进行检测,并注意作用时间、温度对结果的影响。
2、消毒液染菌量结果应≤100cfu/ml,不得检出致病菌。
3、必须选择含相应中和剂的稀释液进行采样,稀释液与消毒液作用时间不少于10min。
4、倾注时琼脂温度保持在45~48℃,温度过高可致细菌死亡,过低则影响倾注效果。
5、含碘消毒剂目前无浓度检测试纸(卡),不能常规检测。
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